PENGERTIAN KULTUR JARINGAN

CULTUR JARINGAN SECARA IN VITRO
 

        Suatu cara memperbanyak tanaman dengan teknik mengisolasi bagian tertentu dari tanaman seperti protoplasma, sel, jaringan dan organ serta menumbuhkannya pada media nutrisi yang mengandung zat pengatur tumbuh tanaman di dalam kondisi yang steril, sehingga bagian - bagian tersebut bisa memperbanyak diri dan beregenerasi menjadi tanaman lengkap/sempurna. Prinsip utama dari teknik kultur jaringan adalah perbanyakan tanaman dengan menggunakan bagian vegetatif tanaman dengan menggunakan media buatan yang dilakukan di tempat steril.

        Kultur jaringan disebut kultur in vitro yakni teknik pemeliharaan jaringan atau bagian dari individu secara buatan yang dilakukan di luar individu yang bersangkutan. In vitro berasal dari bahasa Latin yang artinya "di dalam kaca". Jadi Kultur in vitro dapat diartikan sebagai bagian jaringan yang dibiakkan di dalam tabung inkubasi atau cawan petri dari kaca atau material tembus pandang lainnya.

          Perbanyakan tanaman secara kultur jaringan mempunyai beberapa keunggulan, antara lain: mempunyai sifat yang sama dengan induknya, dapat diperbanyak dalam jumlah yang besar sehingga tidak terlalu membutuhkan tempat yang luas, mampu menghasilkan bibit dengan jumlah besar dalam waktu yang singkat, kesehatan dan mutu bibit lebih terjamin, kecepatan tumbuh bibit lebih cepat dibandingkan dengan perbanyakan konvensional.

Faktor-faktor yang mempengaruhi proses perbanyakan tanaman dengan metoda kultur jaringan, yaitu:

1. Bagian tanaman yang dipergunakan sebagai bahan awal untuk dikulturkan ( daun, batang, akar, cabang, buah, dll)

2. Wadah dan media tumbuh yang steril.

             Media tanaman yang digunakan dalam proses kultur jaringan adalah agar-agar yang telah dicampur dengan zat pengatur tumbuh, air, unsur hara mineral, vitamin.

           Di dalam media terkandung : 1> unsur-unsur mineral makro (Nitrogen (N) 25-60 mM, Kalium, Fosfor (P) 1-3 mM, Kalsium (Ca) 1-3 mM, Magnesium (Mg) 1-3 mM, Sulfur (S) 1-3 mM)); 2> unsur-unsur mikro (Besi (Fe) 1 m M, Mangan (Mn) 5-30 m M, Seng (Zn), Boron (B), Tembaga (Cu) 0.1 m M, Molybdenum (Mo) 1 m M, Cobalt (Co) 0.1 m M, Iodine (I) Nickel (Ni), aluminum (Al), and silicon (Si)); 3> senyawa organik (gula, sukrosa, dan lainnya) 20 to 40 g/l; 4> vitamin (thiamin (vitamin B1), nicotinic acid (niacin), pyridoxine (B6), dan myo-inositol); 4> arang aktif; dan 5> Zat pengatur tumbuh, yang bisa digunakan, yakni: dari golongan auksin seperti Indole Aceti Acid(IAA), Napthalene Acetic Acid (NAA), 2,4-D, CPA dan Indole Acetic Acid (IBA), golongan Sitokinin seperti Kinetin, Benziladenin (BA), 2I-P, Zeatin, Thidiazuron, dan PBA, dan golongan Gibberelin seperti GA3.

3. Lingkungan tumbuh

Tahapan yang dilakukan dalam perbanyakan tanaman dengan teknik kultur jaringan adalah:

1) Dalam pembuatan media  faktor yang harus diperhatikan  dalam perbanyakan secara kultur jaringan. Komposisi media yang digunakan tergantung dengan jenis tanaman yang akan diperbanyak. Media ditempatkan pada tabung reaksi atau botol-botol kaca.

2) Dalam pengambilan eksplan atau bagian tanaman yang sering digunakan untuk kegiatan kultur jaringan adalah batang yang telah dilakukan proses sterilisasi hingga eksplan terhindar dari bakteri .

3) Dalam proses sterilisasi yang perlu diperhatikan adalah  di laminar flow dan peralatan harus disterilkan dengan menggunakan bayklin atau etanol yang disemprotkan secara merata pada peralatan dan orang yang akan melakukan proses kultur jaringan juga harus steril dari bakteri.

4) Dalam kegitan menanam eksplan pada media. Kegiatan ini dilakukan di laminar flow untuk menghindari adanya kontaminasi dari bakteri dan jamur yang dapat menyebabkan kegagalan dalam pertumbuhan eksplan. Tabung reaksi yang telah ditanami ekplan kemudian ditutup dengan menggunakan plastik, kemudian diletakkan pada rak-rak dan ditempatkan di tempat yang steril dengan suhu kamar.

5) Dalam proses pengamatan dilakukan pada minggu pertama dimana eksplan akan menunjukkan adanya pertumbuhan akar yang menandai bahwa proses kultur jaringan yang dilakukan mulai berjalan dengan baik. Kemudian pengamatan dilakukan setiap hari untuk melihat pertumbuhan dan perkembangan akar serta untuk melihat adanya kontaminasi oleh bakteri dan jamur. Eksplan yang terkontaminasi akan menunjukkan gejala seperti berwarna putih atau biru (disebabkan jamur) atau busuk (disebabkan bakteri).

6) Pemindahan eksplan keluar dari dalam laboraturium harus hati -hati dan mengeluarkan eksplan lebih mudah dengan cara memasukkan air kedalam botol kemudian dikeluarkan secara pelan-pelan supaya eksplan tidak rusak dan ditanaman ke dalam pot. Tanaman yang telah ditanaman dalam pot kemudian diletakkan dalam rumah kaca.